GB 4789.1-2010 食品安全標準 食品微生物學(xué)檢驗 總則

 來源：衛(wèi)生部 整理：廣州沃霖

前言
本標準代替GB/T 4789.1-2008《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 總則》。 
本標準與GB/T 4789.1-2008 相比，主要修改如下： 
——修改了標準的中英文名稱； 
——修改了檢驗方法的選擇。 
GB 4789.1-2010所代替標準的歷年版本發(fā)布情況為：
——GB 4789.1-1984、GB 4789.1-1994、GB/T 4789. 1-2003、GB/T 4789. 1-2008

食品安全標準
食品微生物學(xué)檢驗總則
1 范圍
本標準規(guī)定了食品微生物學(xué)檢驗基本原則和要求。
本標準適用于食品微生物學(xué)檢驗。
2 規(guī)范性引用文件
本標準中引用的文件對于本標準的應(yīng)用是*的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件，其版本（包括所有的修 單）適用于本標準。
3 實驗室基本要求
3.1 環(huán)境 
3.1.1 實驗室環(huán)境不應(yīng)影響檢驗結(jié)果的準確性。
3.1.2 實驗室的工作區(qū)域應(yīng)與辦公室區(qū)域明顯分開。
3.1.3 實驗室工作面積和總體布局應(yīng)能滿足從事檢驗工作的需要，實驗室布局應(yīng)采用單方向工作流程，避免交叉污染。
3.1.4 實驗室內(nèi)環(huán)境的溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等應(yīng)符合工作要求。
3.1.5 一般樣品檢驗應(yīng)在潔凈區(qū)域[包括超凈工作臺或潔凈實驗室]進行，潔凈區(qū)域應(yīng)有明顯的標示。
3.1.6 病原微生物分離鑒定工作應(yīng)在二級生物安全實驗室（Biosafety level 2, BSL-2）進行。
3.2 人員
3.2.1 檢驗人員應(yīng)具有相應(yīng)的教育、微生物培訓(xùn)經(jīng)歷，具備相應(yīng)的資質(zhì)，能夠理解并正確實施檢驗。
3.2.2 檢驗人員應(yīng)掌握實驗室生物檢驗安全操作知識和消毒知識。
3.2.3 檢驗人員應(yīng)在檢驗過程中保持個人整潔與衛(wèi)生，防止人為污染樣品。
3.2.4 檢驗人員應(yīng)在檢驗過程中遵守相關(guān)預(yù)防措施的規(guī)定，保證自身安全。
3.2.5 有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行涉及到辨色的實驗。
3.3 設(shè)備
3.3.1 實驗設(shè)備應(yīng)滿足檢驗工作的需要。
3.3.2 實驗設(shè)備應(yīng)放置于適宜的環(huán)境條件下，便于維護、清潔、消毒與校準，并保持整潔與良好的工作狀態(tài)。
3.3.3 實驗設(shè)備應(yīng)定期進行檢查、檢定（加貼標識）、維護和保養(yǎng)，以確保工作性能和操作安全。
3.3.4 實驗設(shè)備應(yīng)有日常性監(jiān)控記錄和使用記錄。
3.4 檢驗用品
3.4.1 常規(guī)檢驗用品主要有接種環(huán)（針）、酒精燈、鑷子、剪刀、藥匙、消毒棉球、硅膠（棉）塞、 微量移液器、吸管、吸球、試管、平皿、微孔板、廣口瓶、量筒、玻棒及L形玻棒等。 
3.4.2 檢驗用品在使用前應(yīng)保持清潔和/或無菌。常用的自凈方法包括濕熱法、干熱法、化學(xué)法等。 
3.4.3 需要自凈的檢驗用品應(yīng)放置在特定容器內(nèi)或用合適的材料（如包裝紙、鋁箔紙等）包裹或加塞，應(yīng)保證自凈效果。 
3.4.4 可選擇適用于微生物檢驗的一次性用品來替代反復(fù)使用的物品與材料（如培養(yǎng)皿、吸管、吸頭、 試管、接種環(huán)等）。 
3.4.5 檢驗用品的儲存環(huán)境應(yīng)保持干燥和清潔,已自凈與未自凈的用品應(yīng)分開存放并明確標識。 
3.4.6 自凈檢驗用品應(yīng)記錄自凈/消毒的溫度與持續(xù)時間。 
3.5 培養(yǎng)基和試劑 
3.5.1 培養(yǎng)基 
培養(yǎng)基的制備和質(zhì)量控制按照GB/T 4789.28的規(guī)定執(zhí)行。 
3.5.2 試劑 
檢驗試劑的質(zhì)量及配制應(yīng)適用于相關(guān)檢驗。對檢驗結(jié)果有重要影響的關(guān)鍵試劑應(yīng)進行適用性驗證。
3.6 菌株
3.6.1 應(yīng)使用微生物菌種保藏專門機構(gòu)或同行認可機構(gòu)保存的、可溯源的標準或參考菌株。
3.6.2 應(yīng)對從食品、環(huán)境或人體分離、純化、鑒定的，未在微生物菌種保藏專門機構(gòu)登記注冊的原始分離菌株（野生菌株）進行系統(tǒng)、完整的菌株信息記錄，包括分離時間、來源，表型及分子鑒定的主要特征等。
3.6.3 實驗室應(yīng)保存能滿足實驗需要的標準或參考菌株，在購入和傳代保藏過程中，應(yīng)進行驗證試驗，并進行文件化管理。
4 樣品的采集
4.1 采樣原則
4.1.1 根據(jù)檢驗?zāi)康?、食品特點、批量、檢驗方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。
4.1.2 應(yīng)采用隨機原則進行采樣，確保所采集的樣品具有代表性。
4.1.3 采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染。
4.1.4 樣品在保存和運輸?shù)倪^程中，應(yīng)采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化，保持樣品的原有狀態(tài)。
4.2 采樣方案
4.2.1 類型 
采樣方案分為二級和三級采樣方案。二級采樣方案設(shè)有n、c和m值，三級采樣方案設(shè)有n、c、m和M值。
n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)；
c：zui大可允許超出m值的樣品數(shù)；
m：微生物指標可接受水平的*值；
M： 微生物指標的zui高安全*值。
注1： 按照二級采樣方案設(shè)定的指標，在n個樣品中，允許有c個樣品其相應(yīng)微生物指標檢驗值大于m值。
注2： 按照三級采樣方案設(shè)定的指標，在n個樣品中，允許全部樣品中相應(yīng)微生物指標檢驗值小于或等于m值；允許有c個樣品其相應(yīng)微生物指標檢驗值在m值和M值之間；不允許有樣品相應(yīng)微生物指標檢驗值大于M值。
例如：n=5，c=2，m=100 CFU/g，M=1 000 CFU/g。含義是從一批產(chǎn)品中采集5個樣品，若5個樣品的檢驗結(jié)果均小于或等于m值（<=100 CFU/g），則這種情況是允許的；若2個樣品的結(jié)果（X）位于m值和M值之間（100 CFU/g < X <=1 000 CFU/g），則這種情況也是允許的；若有3個及以上樣品的檢驗結(jié)果位于m值和M值之間，則這種情況是不允許的；若有任一樣品的檢驗結(jié)果大于M值（>1 000 CFU/g），則這種情況也是不允許的。
4.2.2 各類食品的采樣方案
按相應(yīng)產(chǎn)品標準中的規(guī)定執(zhí)行。
4.2.3 食源性疾病及食品安全事件中食品樣品的采集
4.2.3.1 由工業(yè)化批量生產(chǎn)加工的食品污染導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全事件，食品樣品的采集和判定原則按4.2.1和4.2.2執(zhí)行。同時，確保采集現(xiàn)場剩余食品樣品。
4.2.3.2 由餐飲單位或家庭烹調(diào)加工的食品導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全事件，食品樣品的采集按GB14938中衛(wèi)生學(xué)檢驗的要求，以滿足食源性疾病或食品安全事件病因判定和病原確證的要求。
4.3 各類食品的采樣方法
采樣應(yīng)遵循無菌操作程序，采樣工具和容器應(yīng)無菌、干燥、防漏，形狀及大小適宜。
4.3.1 即食類預(yù)包裝食品
取相同批次的zui小零售原包裝，檢驗前要保持包裝的完整，避免污染。
4.3.2 非即食類預(yù)包裝食品
原包裝小于500 g的固態(tài)食品或小于500 mL的液態(tài)食品，取相同批次的zui小零售原包裝；大于500 mL的液態(tài)食品，應(yīng)在采樣前搖動或用無菌棒攪拌液體，使其達到均質(zhì)后分別從相同批次的n個容器中采集5倍或以上檢驗單位的樣品；大于500 g的固態(tài)食品，應(yīng)用無菌采樣器從同一包裝的幾個不同部位分別采取適量樣品，放入同一個無菌采樣容器內(nèi), 采樣總量應(yīng)滿足微生物指標檢驗的要求。
4.3.3 散裝食品或現(xiàn)場制作食品 
根據(jù)不同食品的種類和狀態(tài)及相應(yīng)檢驗方法中規(guī)定的檢驗單位，用無菌采樣器現(xiàn)場采集5倍或以上 檢驗單位的樣品，放入無菌采樣容器內(nèi), 采樣總量應(yīng)滿足微生物指標檢驗的要求。
4.3.4 食源性疾病及食品安全事件的食品樣品
采樣量應(yīng)滿足食源性疾病診斷和食品安全事件病因判定的檢驗要求。
4.4 采集樣品的標記
應(yīng)對采集的樣品進行及時、準確的記錄和標記，采樣人應(yīng)清晰填寫采樣單（包括采樣人、采樣地點、時間、樣品名稱、來源、批號、數(shù)量、保存條件等信息）。
4.5 采集樣品的貯存和運輸
采樣后，應(yīng)將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實驗室檢驗。運輸時應(yīng)保持樣品完整。如不能及時運送，應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存。
5 樣品檢驗
5.1 樣品處理
5.1.1 實驗室接到送檢樣品后應(yīng)認真核對登記, 確保樣品的相關(guān)信息完整并符合檢驗要求。
5.1.2 實驗室應(yīng)按要求盡快檢驗。若不能及時檢驗，應(yīng)采取必要的措施保持樣品的原有狀態(tài)，防止樣品中目標微生物因客觀條件的干擾而發(fā)生變化。
5.1.3 冷凍食品應(yīng)在 45 ℃以下不超過 15 min，或 2 ℃～5 ℃不超過 18 h 解凍后進行檢驗。
5.2 檢驗方法的選擇
5.2.1 應(yīng)選擇現(xiàn)行有效的標準方法。
5.2.2 食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定性檢驗方法時，應(yīng)以常規(guī)培養(yǎng)方法為基準方法。
5.2.3 食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定量檢驗方法時，應(yīng)以平板計數(shù)法為基準方法。
6 生物安全與質(zhì)量控制
6.1 實驗室生物安全要求
應(yīng)符合GB 19489的規(guī)定。
6.2 質(zhì)量控制
6.2.1 實驗室應(yīng)定期對實驗用菌株、培養(yǎng)基、試劑等設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照。
6.2.2 實驗室應(yīng)對重要的檢驗設(shè)備（特別是自動化檢驗儀器）設(shè)置儀器比對。
6.2.3 實驗室應(yīng)定期對實驗人員進行技術(shù)考核和人員比對。
7 記錄與報告
7.1 記錄
檢驗過程中應(yīng)即時、準確地記錄觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果和數(shù)據(jù)等信息。
7.2 報告
實驗室應(yīng)按照檢驗方法中規(guī)定的要求，準確、客觀地報告每一項檢驗結(jié)果。
8 檢驗后樣品的處理 
8.1 檢驗結(jié)果報告后，被檢樣品方能處理。檢出致病菌的樣品要經(jīng)過無害化處理。
8.2 檢驗結(jié)果報告后，剩余樣品或同批樣品不進行微生物項目的復(fù)檢。